系統情報
 NBRP Rat No: 0840  系統名: LE-Tg(Gt(ROSA)26Sor-CAG-COP4*C167A/YFP*)1Jfhy  通称: LE-Tg(Gt(ROSA)26Sor-CAG-COP4*C167A)1Jfhy
研究責任者:  八尾 寛         東北大学        〒980-8577   宮城県 仙台市青葉区片平2-1-1       日本
Tel: 022-217-6208    Fax: 022-217-6211 Email: hiromu.yawo.c7@tohoku.ac.jp (担当 五十嵐 敬幸:hirobio@med.tohoku.ac.jp)
保存状況:   胚            精子           生体 ?s_ResearchAreaOthers=1 ?s_ResearchAreaOthers=1
毛色  白黒
近交世代数  F1
利用条件  利用者は、研究成果の公表にあたって寄託者の指定する文献を引用する。
利用者は、研究成果の公表にあたって謝辞の表明を必要とする。
利用者は、下記に定める寄託条件の範囲で利用する。この場合、利用者は事前に寄託者の提供承諾書を得る。

1)利用者は、利用者の研究あるいは教育の目的にのみ本件リソースを使用する。
2)本件リソースのすべての性質がわかっているわけではないので、慎重にかつ適切な注意を払って本件リソースを使用する。
3)本件リソースは、診断目的を含めてヒトに使用してはならない。
4)本件リソースを使用した研究成果を科学雑誌に発表する際には、寄託者に事前相談すること。
5)本件リソースは、寄託者の許可なしでは、他へ譲渡ができない。
6)本件リソースは、商業目的にしてはならない。
分類
 Inbred  Segregating  Congenic  Consomic  Recombinant
 Coisogenic  Spont. Mutant  遺伝子改変(GM)  Ind. Mutant  その他 BAC transgenic
コマーシャルブリーダー
研究分野
 糖尿病・肥満  脳神経疾患  眼疾患  歯科疾患  循環器系疾患・高血圧
 がん・腫瘍  代謝、内分泌  耳鼻疾患  免疫・アレルギー疾患  感染症
 骨形態異常  消化器疾患  皮膚疾患  生殖器疾患  発生
 行動・学習  血液疾患  泌尿器疾患  薬理学  その他  神経科学
 対照動物  レポーター遺伝子動物
遺伝子 ROSA26/CAG-floxesSTOP-ChRFR(C167A) BAC. Channelrhodopsin fast receiverをCOP4*C167Aと表記。YFP* (Venus): yellow fluorescent protein variant
由来 バックグラウンド系統:Iar:Long-Evans(熊谷商店)。導入した遺伝子の詳細は以下の通り:ROSA26遺伝子(マウス由来ゲノムDNA配列(クラス1):マウスROSA26 BAC (RP23 244D9)), Neo resistance(V00618, 大腸菌由来遺伝子ユニット(クラス1)),loxP sequence(バクテリオファージ由来ゲノムDNA配列(クラス1)), FRT配列(酵母由来ゲノムDNA配列(クラス1)),adenylation signal sequence(SV40由来遺伝子ユニット(クラス2)), immediate-early enhancer(CMV由来ゲノムDNA配列(クラス2)), β-actin, promoter(ニワトリ由来ゲノムDNA配列(クラス1)),β globin, exon sequence(ウサギ由来ゲノムDNA配列(クラス1)),β globin, polyA sequence(ウサギ由来ゲノムDNA配列(クラス1)), Channelrhodopsin fastreceiver(C167A) (緑藻類Chlamydomonas reinhardtii由来DNA配列). なお、チャネルロドプシンにVenusがタグ付けされている。挿入遺伝子のコピー数が1と3の系統があり、それぞれ系統のLine No.を1と2とした。ライン間で、コピー数以外に違いはない。
特性など 外因性Creタンパク質の存在下において、光感受性カチオンチャネルの改変体であるChRFR(C167A)をユビキタスに発現する。 ステップ関数型チャネルロドプシン(step-function opsin, SFO)の一つに数えられるChRFR(C167A)は、青色光によって開口し、黄色光によって閉口する。このチャネルを発現する細胞群は、上記二種類の光を照射することによって興奮性が制御可能となることが予想される。チャネルロドプシンにVenusがタグ付けされており、それをマーカーとして発現細胞を可視化する
繁殖・維持方法 野生型Long-Evansとの通常交配
遺伝診断法 floxedSTOP配列内に存在するneoカセットをPCR法により増幅することにより遺伝子判定を行う。 ・Primer set...Neo-F1 : 5’- ctatgactgggcacaacagacaat -3', Neo-R1 : 5’- aactcgtcaagaaggcgatagaag -3’ ※Tg(+) → 726bp 94℃ for 2min ↓ 98℃ for 10sec 68℃ for 60sec (30 cycles) ↓ 4℃
参考文献 Igarashi H, Ikeda K, Onimaru H, Kaneko R, Koizumi K, Beppu K, Nishizawa K, Takahashi Y, Kato F, Matsui K, Kobayashi K, Yanagawa Y, Muramatsu SI, Ishizuka T, Yawo H.
Targeted expression of step-function opsins in transgenic rats for optogenetic studies.
Sci Rep. 2018 Apr 3;8(1):5435.
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