系統情報  NBRP Rat No: 0895  系統名: F344-Il2rgem1IexasRag2em1Iexas  通称: ダブルKO Rat Genome Database 研究責任者:  真下 知士         東京大学医科学研究所        〒108-8639   〒108-8639 東京都港区白金台4-6-1       日本 Tel: 03-6409-2489    Fax:  Email: mashimo@ims.u-tokyo.ac.jp 保存状況：   胚            精子           生体 毛色   近交世代数  N3 利用条件  利用者は、下記に定める寄託条件の範囲で利用する。この場合、利用者は事前に寄託者の提供承諾書を得る。 商用に使用する際は、本同意書とは別に、寄託者と契約を結ばねばならない。 分類   Inbred  Segregating   Congenic   Consomic   Recombinant   Coisogenic   Spont. Mutant  Transgene  Ind. Mutant  その他  コマーシャルブリーダー 研究分野   糖尿病・肥満  脳神経疾患  眼疾患   歯科疾患  循環器系疾患・高血圧  がん・腫瘍  代謝、内分泌  耳鼻疾患  免疫・アレルギー疾患  感染症  骨形態異常   消化器疾患  皮膚疾患   生殖器疾患   発生  行動・学習  血液疾患  泌尿器疾患   薬理学  その他    対照動物  レポーター遺伝子動物 遺伝子 interleukin 2 receptor gamma (Il2rg), recombination activating 2(Rag2) 由来 【東京大学（分担機関）から提供します】 CRISPR/Cas9によりラットIl2rg遺伝子、ラットRag2遺伝子を標的として、F344/Jcl系統から作製した。Il2rg用gRNA配列はCCAACCTCACTATGCACTATAGG（PAM配列は初めのCCA）、Rag2用gRNA配列はAACATAGCCTTAATTCAACCAGG（PAM配列は最後のAGG）Cas9はT7-NLS hCas9-pA (RDB13130)から転写したmRNAを使用。また、遺伝子導入はエレクトロポレーションで行った。Off targetの解析はしていない。 特性など X染色体のIl2rg遺伝子の5bp欠損および第3染色体のRag2遺伝子の1bp挿入により、重度複合免疫不全症（SCID）を発症するラット。SPF環境下ではほぼ正常に発育する。性成熟はやや遅い。 繁殖・維持方法 雄ヘミと雌ホモの交配により維持。 遺伝診断法 PCR、電気泳動、およびサンガーシークエンスにより判別可能。 Il2rg: ワイルド292 bp、ミュータント287 bp。プライマー：TTGCTGACTTCTATGGACCTTAAA、TTCATCTGGTCTGAACTGATAACTTAT Rag2: ワイルド381bp、ミュータント382bp。プライマー：GGGGAGAAGGTGTCTTACGG、AGGTGGGAGGTAGCAGGAAT 参考文献 Mashimo T, Takizawa A, Voigt B, Yoshimi K, Hiai H, Kuramoto T, Serikawa T. Generation of knockout rats with X-linked severe combined immunodeficiency (X-SCID) using zinc-finger nucleases. PLoS One. 2010 Jan 25;5(1):e8870. 系統情報